Centro di Referenza Nazionale per Anisakiasis (C.re.N.A.)

Valutazione dei nematodi parassiti appartenenti alla famiglia Anisakidae da due passaggi::

  1. Identificazione delle larve (memorizzato nel 70% di alcol) da pesce ispezione e caratterizzazione morfologica mediante microscopia ottica. L identificazione dei parassiti è effettuata mediante test fenotipici. Il primo consiste nell’osservazione microscopica e confronto con caratteristiche morfologiche chiavi di identificazione, per genere identificazione dei nematodi della famiglia Anisakidae.
  1. Caratterizzazione molecolare PCR-RFLP o multiplex PCR della sua-regione di DNA, il mtDNA COX2 e/o la sua regione di DNA le analisi di sequenza. Questi metodi sono in grado di identificare le specie di Anisakidae parassiti come ad esempio Anisakis tipo I (A. simplex s.s., A. pegreffii, A. typica, A. ziphidarum, A. nascetti, A. berlandi) e Anisakis tipo II (A. physeteris, A. brevispiculata, A. paggiae), Pseudoterranova (P. decipiens s.s., P. krabbei, P. bulbosa, P. azarasi, P. cattani), Contracaecum (C. osculatum, C. rudolphii) e Hysterothylacium (H. aduncum, H. fabri) generi. Tempo reale-PCR sono effettuate per l’identificazione di Anisakids traccia di DNA come Anisakis spp e Pseudoterranova spp in diversi prodotti ittici trasformati. Il sequenziamento è effettuata per confermare la diagnosi e per la specie/ceppo la digitazione.

Dettagli degli esami sono riportati nelle tabelle seguenti.

Lo standard delle procedure operative (POS/PdP) sono certificate secondo la norma UNI CEI EN ISO/IEC 17025:2005.

Molecular and Optical-microscopy diagnostic

Pathogen Matrix Method POS/PdP
Anisakidae larvae

 

Viscera, coelomic cavity and muscle tissue of fish Optical-microscopy observation POS-CRENA 03
Anisakis spp Anisakis  larvae PCR-RFLP POS CRENA 02
Anisakis spp, Pseudoterranova spp Processed fish products Real Time PCR POS CRENA 05
Pseudoterranova spp Pseudoterranova  larvae mtDNA cox2 sequence analyses POS CRENA 06
Nematodes of the Anisakidae family (Anisakis, Pseudoterranova, Hysterothylacium, Contracaecum osculatum, Contracaecum rudolphii) Anisakidae larvae Multiplex PCR PdP CRENA 07
Nematodes of the Anisakidae family Purified PCR products PCR Sequencing

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